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    為什么細(xì)胞會(huì)抱團(tuán)?因?yàn)樘鞖饫淞耍?/h1>
    發(fā)布時(shí)間: 2021-12-09  點(diǎn)擊次數(shù): 3694次

    是否總是遇到細(xì)胞抱團(tuán)的現(xiàn)象?是否總是因?yàn)楦悴磺宄?xì)胞抱團(tuán)原因而困惑?是否總是因?yàn)殡y以將抱團(tuán)細(xì)胞拯救回來(lái)而抓狂?童鞋們,我來(lái)拯救你們的細(xì)胞了,今天給大家從四個(gè)層面剖析細(xì)胞抱團(tuán)的真實(shí)原因,快來(lái)圍觀吧!


    一、細(xì)胞本身生長(zhǎng)特性有抱團(tuán)傾向

    有些細(xì)胞本身有抱團(tuán)生長(zhǎng)的特性,給大家看五種喜歡抱團(tuán)的細(xì)胞類型:


    細(xì)胞類型①:NCI-H716 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞

    形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣

    生長(zhǎng)特性:懸浮生長(zhǎng)


    圖片
    細(xì)胞喜歡在懸浮液中呈葡萄狀聚集,抱團(tuán)細(xì)胞粒粒飽滿


    細(xì)胞類型②:Caco-2人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞

    形態(tài):上皮樣

    生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)


    圖片
    此細(xì)胞喜歡貼壁成片分布,呈融合狀,細(xì)胞個(gè)頭大小不勻


    細(xì)胞類型③:CaLu-3 人肺癌細(xì)胞

    形態(tài):上皮樣

    生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)


    圖片
    此細(xì)胞也是喜歡聚集分布,呈片狀,片狀之間有空白



    細(xì)胞類型④:SH-SY5Y人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

    形態(tài):上皮樣

    生長(zhǎng)特性:貼壁和懸浮生長(zhǎng)


    圖片
    此細(xì)胞貼壁居多,有輕微的抱團(tuán)傾向



    細(xì)胞類型⑤:BT-474人乳腺癌細(xì)胞

    形態(tài):上皮樣

    生長(zhǎng)特性:貼壁、片狀生長(zhǎng)


    圖片
    此細(xì)胞也是喜歡片狀生長(zhǎng)



    除了有喜歡抱團(tuán)的細(xì)胞類型,也會(huì)有喜歡分散生長(zhǎng)的細(xì)胞類型,來(lái)給大家展示二種細(xì)胞類型:

    細(xì)胞類型①:MSC(人源脂肪來(lái)源)

    形態(tài):成纖維樣

    生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)


    圖片
    此細(xì)胞成纖維樣,均勻分布,平鋪皿底,不留空隙



    細(xì)胞類型②:HEF小兒包皮成纖維細(xì)胞(人源脂肪來(lái)源)

    形態(tài):成纖維樣

    生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)


    圖片
    此細(xì)胞也是喜歡分散生長(zhǎng),均勻分布



    大多數(shù)上皮樣或神經(jīng)母細(xì)胞瘤樣的細(xì)胞更喜歡抱團(tuán)生長(zhǎng),而大多數(shù)成纖維樣細(xì)胞更喜歡分散、均勻生長(zhǎng)。


    又有一個(gè)問(wèn)題來(lái)了,那就是我們?nèi)绾螀^(qū)分細(xì)胞抱團(tuán)正不正常。

    這里開(kāi)始劃重點(diǎn)了,大家看好了:

    1. 如果細(xì)胞本身是分散生長(zhǎng),結(jié)果抱團(tuán)嚴(yán)重,說(shuō)明細(xì)胞“生病"了,我們要給細(xì)胞“診治"。

    2. 如果本身生長(zhǎng)特性就有抱團(tuán)的細(xì)胞,如何判斷它的抱團(tuán)正不正常呢?


    這里小編告訴您,細(xì)胞哪怕是抱團(tuán)了,也是“粒粒飽滿,棱角分明"的,回頭看看上面抱團(tuán)的細(xì)胞,是不是細(xì)胞之間有明確的“分界線",這說(shuō)明它們抱在一起很健康;而異常的細(xì)胞抱團(tuán),你是觀察不到細(xì)胞之間的“界限"的,細(xì)胞形態(tài)也不規(guī)則,邊緣模糊,遠(yuǎn)遠(yuǎn)看去,抱團(tuán)的細(xì)胞像“一團(tuán)漿糊"。



    二、細(xì)胞老化更容易抱團(tuán) 


    細(xì)胞類型:MSC(人源臍帶來(lái)源第6代)

    形態(tài):成纖維樣

    生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)

    圖片
    如圖所示:

    人臍帶來(lái)源第6代的間充質(zhì)干細(xì)胞,白色箭頭指示的是發(fā)生細(xì)胞老化的MSC細(xì)胞,β-半乳糖苷酶染色陽(yáng)性,染上藍(lán)色。由圖片可以看出老化細(xì)胞體積增大、細(xì)胞扁平。白圈圈起來(lái)的是聚團(tuán)細(xì)胞,老化細(xì)胞容易聚團(tuán)生長(zhǎng),狀態(tài)變差。


    三、血清批間差可能導(dǎo)致細(xì)胞抱團(tuán) 

    那么問(wèn)題來(lái)了,血清為何有批間差?

    因?yàn)檠鍋?lái)源于動(dòng)物,其組成成分有1000種左右,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏哪挲g、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件而異。每個(gè)批號(hào)的組分百分比含量都是不固定的,所以批間差異是存在的。

    圖片

    H9c2 低密度正常形態(tài)

    舊批次血清


    圖片

    H9c2 低密度抱團(tuán)形態(tài)

    新批次血清


    圖片

    H9c2高密度異常形態(tài)

    舊批次血清


    圖片

    H9c2高密度異常形態(tài)

    新批次血清


    血清批間差可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞抱團(tuán)。

    如圖所示,大鼠心肌細(xì)胞在更換了新批次的血清之后,隨著傳代次數(shù)的增加,抱團(tuán)明顯。正常低密度下,細(xì)胞舒展開(kāi)來(lái),均勻分散,但異常的的細(xì)胞會(huì)呈現(xiàn)聚集生長(zhǎng)狀態(tài),高密度下正常細(xì)胞像鋪路石一樣均勻鋪滿,不留空隙,但高密度下異常的細(xì)胞,形態(tài)模糊,難以辨認(rèn),像四川九寨溝一樣的溝壑重生。


    四、胰酶消化不當(dāng)容易導(dǎo)致細(xì)胞抱團(tuán) 

    圖片

    HEK293細(xì)胞


    導(dǎo)致細(xì)胞抱團(tuán)的第一種情況是胰酶消化操作不當(dāng)。

    如果您經(jīng)常遇到傳代的細(xì)胞貼壁后老是貼壁不勻,成片分布,抱團(tuán)生長(zhǎng),來(lái)看看你有沒(méi)有注意這幾個(gè)細(xì)節(jié)噢。

    1、如圖所示,HEK 293因消化過(guò)度或吹打過(guò)猛導(dǎo)致細(xì)胞受傷嚴(yán)重,破損的細(xì)胞碎片容易粘連抱團(tuán);

    2、消化時(shí)細(xì)胞融合率太高,成片脫落,將不容易被吹散,容易抱團(tuán),我們建議細(xì)胞融合率達(dá)到80%傳代為佳;

    3、吹打力度不足,難以將成片脫落的細(xì)胞吹散,容易抱團(tuán)。



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