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    轉(zhuǎn)染造血干細(xì)胞(HPCs)共轉(zhuǎn)染2種質(zhì)粒DNA發(fā)表論文分享

    發(fā)布時(shí)間: 2022-04-11  點(diǎn)擊次數(shù): 1352次

    zeta life轉(zhuǎn)染造血干細(xì)胞(HPCs)共轉(zhuǎn)染2種質(zhì)粒DNAIF11.556)論文分享

    zeta life轉(zhuǎn)染造血干細(xì)胞(HPCs)共轉(zhuǎn)染2種質(zhì)粒DNA(IF11.556)論文分享


    zeta life轉(zhuǎn)染造血干細(xì)胞(HPCs)共轉(zhuǎn)染2種質(zhì)粒DNA(IF11.556)論文分享編輯

     

    一、 轉(zhuǎn)染造血干細(xì)胞(HPCs)或造血祖細(xì)胞-共轉(zhuǎn)染兩種質(zhì)粒DNA文章概述:

    檢測(cè)特異性蛋白Sp1對(duì)FcγRIIB的影響在造血干細(xì)胞(HPCs )中表達(dá),F(xiàn)cγRIIB 啟動(dòng)子區(qū)域?yàn)?-1500 ~ +1從轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)),合成并亞克隆到pGL3載體, Sp1結(jié)合位點(diǎn) 5'-GGGGCGGGGC突變?yōu)?5'-AAGGCAAGGC,含有 Sp1過(guò)表達(dá)或含有模擬物。

    使用美國(guó)Zeta Life公司Advanced DNA RNA轉(zhuǎn)染試劑(#AD600025,Zeta Life, USA)對(duì)造血干細(xì)胞(HPCs )共轉(zhuǎn)染 1 μg 報(bào)告載體和 20 ng pSV-Renilla 表達(dá)載體(含、模擬物和 Sp1),轉(zhuǎn)染的細(xì)胞是孵育 48 小時(shí)后收細(xì)胞并檢測(cè)。

    文章作者:重慶大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院腫瘤內(nèi)科IF11.556

    標(biāo)題:FcγRIIB potentiates differentiation of myeloid-derived suppressor cells to mediate tumor immunoescape


    二、轉(zhuǎn)染造血干細(xì)胞(HPCs)

    zeta life轉(zhuǎn)染造血干細(xì)胞(HPCs)共轉(zhuǎn)染2種質(zhì)粒DNA(IF11.556)論文分享

     

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    FcγRIIB promoter luciferase reporter assay

    To measure the effect of Sp1 on FcγRIIBexpression in HPCs, the FcγRIIB promoter region

    (-1500 ~ +1 from the transcription starting site) wassynthesized by GenScript co., LTD (Nanjing, China)and subcloned into pGL3-basic vector (Promega,Madison, WI, USA), Sp1 binding site 5’-GGGGCGGGGC was mutated to 5’-AAGGCAAGGC.Lentivectors containing Sp1 overexpression or a lentivector containing mock were obtained from Genechem (Shanghai, China). The HPCs were transfected with 1 μg of reporter vector and 20 ng of pSV-Renilla expression vector (mock and Sp1) using Advanced DNA RNA Transfection Reagent (Cat No.AD600025, Zeta-life). Transfected cells were incubated for 48 h, Luciferase and Renilla activitie were measured using the dual-luciferase reporter system kit (Cat No. E1910, Promega). The transfection was performed according to the manufacturer' protocol.


    、美國(guó)Zeta Life 公司與美國(guó)加利福尼亞大學(xué)舊金山校區(qū)聯(lián)合開(kāi)發(fā)用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞、活體動(dòng)物轉(zhuǎn)染的 Advanced DNA RNA 第三代多肽小分子轉(zhuǎn)染試劑,此技術(shù)成為新的蛋白功能、免疫細(xì)胞及干細(xì)胞治療、研發(fā)及生產(chǎn)的主要關(guān)鍵技術(shù)之一。


    、文獻(xiàn)中所用轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)品信息

    產(chǎn)品名稱:Advanced  DNA RNA  轉(zhuǎn)染試劑

    貨號(hào):AD600025、AD600050、AD600075、AD600150

    規(guī)格:0.25ML、0.5ML、0.75ML、1.5ML

     

    安培生物科技有限公司是美國(guó) Zeta Life 公司的中國(guó)代理商。Advanced DNA RNA轉(zhuǎn)染試劑,均經(jīng)過(guò)反復(fù)充分驗(yàn)證,轉(zhuǎn)染效果好且重復(fù)性佳,提供完整售后服務(wù)和技術(shù)支持。


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